自然水體中存在大量微生物,在工業(yè)生產(chǎn)中用水設(shè)備可能發(fā)生微生物腐蝕,引發(fā)設(shè)備點(diǎn)蝕穿孔等問題。在冷卻水系統(tǒng)中,微生物黏附在換熱管表面形成生物膜,導(dǎo)致熱傳遞效率降低、管道堵塞[1],并造成能量損耗和經(jīng)濟(jì)損失[2]。選用耐蝕材料是控制微生物腐蝕的方法之一,但這會造成投入成本過大。另外,投加緩蝕劑和殺菌劑也是防治微生物腐蝕[3]的常用方法。

緩蝕劑可以抑制腐蝕電池陽極或陰極反應(yīng)的進(jìn)行,從而降低金屬的腐蝕速率,其緩蝕效果與水中微生物種類相關(guān),因此在投加時(shí)需考慮微生物因素[4]。殺菌劑通過將微生物殺滅,從源頭上控制微生物腐蝕,但使用量較大,可能對環(huán)境造成不利影響,且長期使用單一種類殺菌劑,會使微生物產(chǎn)生耐藥性,增大去除微生物的難度[5]。

ZnO納米粒子對大腸桿菌[6]、金黃色葡萄球菌[7]及綠膿桿菌[8]等細(xì)菌普遍具有殺滅性,殺菌效果與細(xì)菌種類相關(guān),如：10 mg·L-1 ZnO納米粒子對枯草芽孢桿菌CB310菌株的抑制率可達(dá)到90%,而相同含量下對大腸桿菌DH5α菌株的抑制率僅為14%[9]。目前,有關(guān)納米粒子殺菌性的研究對象多為致病菌,對腐蝕性細(xì)菌的殺菌性能研究不多。為此,作者采用微生物培養(yǎng)與檢測、電化學(xué)測試及表面分析等方法研究了ZnO納米粒子對硫酸鹽還原菌（SRB）的抑菌性能及對304不銹鋼的微生物腐蝕行為影響。

1. 試驗(yàn)

1.1 試驗(yàn)材料和介質(zhì)

試驗(yàn)用ZnO納米粒子平均粒徑為25 nm,圖1為用FEOL JEM 2100F型透射電子顯微鏡（TEM）表征的ZnO納米粒子形貌。試驗(yàn)材料為304不銹鋼,所用藥品均購自阿拉丁工業(yè)公司。

圖 1 ZnO納米粒子的TEM圖

Figure 1. TEM image of ZnO nanoparticles

試驗(yàn)溶液為模擬地表水（SCW）,主要組成為：7.5 mmol·L-1 NaCl,2.0 mmol·L-1 NaHCO3,3.5 mmol·L-1 Na2SO4,0.25 mmol·L-1 MgSO4及0.5 mmol·L-1 CaCl2。將培養(yǎng)基中的SRB以1∶10（體積比）接種至經(jīng)高壓滅菌后的模擬地層水中,用石蠟密封維持溶液的厭氧環(huán)境。

1.2 細(xì)菌培養(yǎng)和計(jì)數(shù)

試驗(yàn)用菌種為SRB,取自池塘污泥,經(jīng)提取并純化后得到,微生物種群分析檢測出該菌株為脫硫弧菌屬。用于菌種培養(yǎng)和活化的液體培養(yǎng)基的組成為：0.2 g·L-1 MgSO4·7H2O,0.01 g·L-1 KH2PO4,0.2 g·L-1（NH4）2Fe（SO4）2,10.0 g·L-1 NaCl,4.0 m L·L-1乳酸鈉,1.0 g·L-1酵母浸汁,0.1 g·L-1維生素C。調(diào)節(jié)培養(yǎng)基p H至7.0~7.2,保持菌種的培養(yǎng)溫度為35 ℃。

溶液中SRB的數(shù)量測定采用稀釋平板計(jì)數(shù)試驗(yàn)。將制備好的瓊脂平板（含不同量ZnO納米粒子）在35 ℃條件下進(jìn)行培養(yǎng),經(jīng)48 h培養(yǎng)后對菌落計(jì)數(shù),并通過式（1）計(jì)算抑菌率。

式中：y為抑菌率,%；S0為對照樣品平均菌落數(shù)；S為試樣樣品平均菌落數(shù)。

1.3 水中自由基的測定

水中羥基自由基（·OH）測定：以對苯二甲酸為熒光捕捉劑,使用RF-5301pc型熒光分光光度計(jì)獲得水中·OH對應(yīng)的三維激發(fā)-發(fā)射矩陣（EEM）熒光光譜。

超氧陰離子自由基測定：采用羥氨氧化法[10],以模擬地表水代替納米氧化鋅懸浮液作為參比溶液。

1.4 電化學(xué)測試

將304不銹鋼電極在不同ZnO納米粒子含量的模擬地表水（含菌和無菌）中浸泡7 d后進(jìn)行電化學(xué)測試。測試在CHI660e型電化學(xué)工作站上完成并采用三電極體系。304不銹鋼電極作為工作電極,飽和甘汞電極作為參比電極,鉑電極作為輔助電極。電化學(xué)阻抗譜的測試頻率范圍為0.01 Hz~100 k Hz,幅值為5 m V。極化曲線測試的掃描速率為1 m V·s-1,溫度為35 ℃。

1.5 金屬表面形貌觀察

將304不銹鋼掛片置于含ZnO納米粒子的有菌體系中浸泡7 d,取出后用2%戊二醛固定生物膜,采用掃描電鏡（SEM）對掛片表面形貌進(jìn)行觀察,并采用掃描電鏡附帶的能譜分析儀（EDS）對其表面微區(qū)化學(xué)成分進(jìn)行分析。

2. 結(jié)果與討論

2.1 ZnO納米粒子的抑菌性能

細(xì)菌在溶液中接觸到材料后會在材料表面形成生物膜,細(xì)菌的附著被認(rèn)為是微生物腐蝕的前兆[11]。不銹鋼表面黏附的菌量與納米粒子的抑菌性能相關(guān)。測定了水中不同含量ZnO納米粒子對SRB的抑菌性能,如表1所示。結(jié)果表明,ZnO納米粒子有一定的抑菌性,隨ZnO納米粒子含量增大,抑菌性能逐漸增強(qiáng),當(dāng)其質(zhì)量濃度為100 mg·L-1時(shí),抑菌率可達(dá)89.3%。

一般認(rèn)為,納米粒子在水中可以產(chǎn)生活性氧物質(zhì),活性氧物質(zhì)（包括·OH、等）誘導(dǎo)細(xì)菌氧化應(yīng)激是納米粒子具有抗菌性的重要原因[12]。和·OH均具有很強(qiáng)的氧化性,可破壞細(xì)胞內(nèi)的有機(jī)物,進(jìn)而破壞微生物的結(jié)構(gòu)并抑制其生理活性[13]。ZnO納米粒子的抑菌性能與其在水溶液中催化產(chǎn)生的活性氧物質(zhì)相關(guān)。當(dāng)體系中存在ZnO納米粒子時(shí),可在體系中檢測到。表2為水中檢測到的含量與ZnO納米粒子含量的對應(yīng)關(guān)系?？梢?隨著ZnO納米粒子含量升高,水中的含量也隨之增大。圖2為不同ZnO納米粒子含量水溶液的熒光光譜。圖2（b）、（c）、（d）中,熒光位置的出現(xiàn)表明水中產(chǎn)生了·OH（最高峰出現(xiàn)在激發(fā)波長Ex為320 nm、發(fā)射波長Em為430 nm處）,且熒光強(qiáng)度隨ZnO納米粒子含量增大而增強(qiáng),表明隨ZnO納米粒子含量增大,水中生成了更多的·OH。水中活性氧物質(zhì)的產(chǎn)生主要有以下兩方面原因：ZnO納米粒子自身缺陷導(dǎo)致催化反應(yīng)生成活性氧物質(zhì)[14]；在試驗(yàn)過程中,自然光導(dǎo)致納米粒子光催化形成活性氧物質(zhì)[15]。上述結(jié)果說明,添加ZnO納米粒子可使水中生成強(qiáng)氧化性的活性氧物質(zhì)和·OH,從而對SRB產(chǎn)生了較強(qiáng)的抑制作用。

ZnO質(zhì)量濃度/（mg·L-1）	20	50	100
質(zhì)量濃度/（mg·L-1）	0.152	0.178	0.208

圖 2 不同ZnO納米粒子含量水樣的熒光光譜圖

Figure 2. Fluorescence spectra of water samples with different concentrations of ZnO nanoparticles

2.2 ZnO納米粒子對不銹鋼微生物腐蝕行為的影響

在不同ZnO納米粒子含量的模擬地層水中浸泡7 d后,對304不銹鋼進(jìn)行電化學(xué)阻抗譜測試,結(jié)果如圖3所示,采用圖4所示等效電路對電化學(xué)阻抗譜進(jìn)行擬合,結(jié)果見表3。圖中,Rs為溶液電阻,Rct為電荷轉(zhuǎn)移電阻,Rf為不銹鋼表面鈍化膜電阻,Qdl和Qf分別為用于表示雙電層電容和膜電容的常相角元件。

圖 3 在不同ZnO納米粒子含量的模擬地層水（有菌、無菌）中304不銹鋼的電化學(xué)阻抗譜

Figure 3. EIS of stainless steel 304 in simulated formation water (with and without bacteria) with different concentrations of ZnO nanoparticles: (a) Nyquist diagram: (b) Bode diagram

圖 4 腐蝕體系的等效電路

Figure 4. Equivalent circuit of corrosion system